何谓PCR,包括哪些步骤?
PCR即聚合酶链反应,是一种特异性的体外DNA序列扩增技术,即以目的基因为模板,在寡核苷酸引物和4种脱氧核糖核酸存在的条件下,依赖DNA聚合酶的酶促合成反应。
PCR包括3个步骤:
①变性:通过加热使DNA双螺旋结构解离成单链DNA。
②退火:在变性后突然使温度降低,使引物与其互补的模板形成杂交链:
③延伸:在DNA聚合酶和4种脱氧核糖核酸及Mg2+存在的条件下,耐热的DNA聚合酶催化以引物为起点的DNA链的延伸。如此三步形成一个循环,每一次循环的产物又和原始模板一起作为下一个循环的模板。因此目的DNA产物是以几何级数增长的。
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