TRH具有兴奋腺垂体合成分泌TSH的作用，给予一定量的外源性TRH观察垂体前叶对之的反应能力的试验称为TRH兴奋试验。其方法是：受检者空腹并休息半小时，静脉注射TRH200-500μg(溶于2ml生理盐水中)，并于注射前和注射后的15分钟、30分钟、60分钟、120分钟各静脉采血一次，测血清TSH，以TSH浓度为纵坐标，时间为横坐标绘出TSH的反应曲线。TRH兴奋试验可用来了解垂体和甲状腺功能，鉴别甲状腺功能异常的病变部位，主要用于甲状旁腺功能减退病变部位的分析。