Southern杂交操作步骤：
（1）用限制性内切酶酶切DNA，经凝胶电泳分离各酶切片段；
（2）转膜：将DNA片段转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上；
（3）预杂交：封阻滤膜上非特异性位点；
（4）杂交：让探针与同源DNA片段特异性结合；
（5）洗脱：去除非特异性结合的探针；
（6）自显影检查目的DNA所在的位置。
Southern杂交影响因子
1）、目的DNA在总DNA中所占的比例
2）、探针的大小和标记效率
3）、转移到滤膜上的DNA量
4）、探针与靶DNA的同源性