简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。
(1)病料的采集和处理 可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织,按1:5的比例假入灭菌的生理盐水或缓冲液,用研磨器将组织研碎制成20%的悬液,反复冻融2-3次,5000r/min离心20分钟,取上清,用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。
(2)分离培养 将处理好的病料经尿囊腔接种9-11日龄无母源抗体的鸡胚,37℃孵育,每天照蛋2次,弃除24小时内死亡胚,收集24 -96小时死亡胚,96小时内未死亡胚取出。
(3)收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性,对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒,采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。
确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定--致病性试验。
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