试述炭疽病的微生物学诊断方法。
疑似炭疽死亡动物的尸体,应尽快自末梢血管(耳尖、尾尖等)采血,涂片染色镜检,取血后应立即用烙铁将创口烙焦,以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中,接触了氧,气温又不适宜其生长时,就会形成芽孢,所以尸体严禁剖检。
(1)涂片镜检 取标本涂片进行革兰氏染色,发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌,结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”,确诊须做分离培养和动物接种。
(2)分离培养 取病料接种普通琼脂或血液琼脂,37℃培养18-24h,观察有无典型的炭疽杆菌菌落,同时革兰氏染色镜检。
(3)动物试验 将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后,皮下注射小鼠0、1-0、2ml|如为炭疽,多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿,脾脏肿大。取脏器涂片镜检,如发现有荚膜竹节状大杆菌,可确诊。
(4)血清学试验 常用炭疽环状沉淀试验(Ascoli氏反应)。方法是:在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠,若二液接触面产生灰白色沉淀环,即可诊断。
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