间接ELISA方法的主要原理、试验步骤、结果判定方法(可举例说明)
(1)基本原理:把抗原在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面;测定时,将受检样品和酶标记物按一定程序反应形成复合物,并加入酶作用的底物;反应终止时,根据定性或定量分析有色产物的量来确定待检样品中的抗体的含量。
(2)试验步骤:抗原包被→洗涤封闭→加待检血清(同时设立阴阳性对照)→反应一定时间→洗涤→加酶标二抗→反应一定时间→洗涤→加底物溶液→反应一定时间→终止反应→判定结果
(3)结果判定:肉眼观察或仪器测定,可以阳性与阴性表示结果、以P/N比值表示结果、以终点滴度表示结果或以标准曲线进行定量测定。
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