将抗原或抗体固相化的过程称为包被（coating）。由于裁体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃过夜。如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下，如在包被后再用1％～5%牛血清蛋白包被一次，可以消除这种干扰。这一过程称为封闭（blocking）。