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概述PCR技术的基本原理及过程。

问答题
2021-12-30 07:09
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正确答案

PCR技术是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法。其特异性是由两条人工合成的引物序列决定的。所谓引物就是指与待扩增DNA片段两翼互补的寡核苷酸(一般20~30个碱基),其本质是DNA片段。待扩增DNA模板加热变性后,两引物分别与两条DNA的两翼序列特异性结合,此时两引物的3′端相对,5′端相背。在合适的条件下,DNATaq酶催化反应体系中的游离单核苷酸沿着引物的3′端,按照碱基配对的原则延伸形成两条与模板DNA互补的半保留复制链。重复上述变性→退火→延伸的过程可以获得更多的复制链,如此反复进行,DNA可呈2n指数增加。按理论计算,一般DNA链经过20~30次循环放大其拷贝数为百万倍。但每次循环并不是每条DNA链都起到模板作用指导DNA的合成,尽管如此,在短时期内即可合成大量的DNA产物。


试题解析

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