什么是蛋白质的沉淀作用?有哪些沉淀蛋白质的方法?各方法沉淀的机理是什么?
蛋白质在水溶液中可形成亲水的胶体,蛋白质从胶体溶液析出的现象称为蛋白质沉淀作用。
沉淀蛋白质的方法有:
盐析法:在蛋白质溶液中加入高浓度的强电解质溶液如硫酸铵、硫酸钠等,蛋白质
从溶液中产生沉淀。
机理:破坏了蛋白质分子表面的水化膜和双电层(净电荷),蛋白质溶液失去
稳定性而产生沉淀。
有机溶剂沉淀法:乙醇、丙酮等有机溶剂可使蛋白质产生沉淀。
机理:降低溶液的介电常数,也破坏了蛋白质的水化膜,蛋白质产生沉淀,
但必须低温操作,以防止蛋白质的变性。
等电点沉淀法:用稀酸或稀碱调节蛋白质的溶液于某蛋白质等电点处,该蛋白质沉淀析出。
机理:中和蛋白质表面水化膜。
重金属沉淀法:蛋白质在等电点以上的pH下,易于重金属产生沉淀。
机理:重金属与带负电的蛋白质羧基结合产生不可逆沉淀。
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