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[单选题]T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将的答案
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T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起,其底物的关键基团是()
单选题
2021-07-17 23:53
A、2'-OH和5'-P
B、2'-OH和3'-P
C、3'-OH和2'-P
D、3'-OH和5'-P
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D
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连接板的功能是将所有的板连接在一起。
保持连接器是利用弹簧的压力,将()与()连接在一起。
若羰基上连接有能形成共轭的基团,导致羰基振动频率()
DNA复制时,复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制,()链上是连续复制,()链上是不连续合成的,即先合成出小的DNA片段,称为冈畸片段,然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量,细菌内以()为能量来源,动物细胞和某些噬菌体以()为能量来源。
DNA重组的顺序是()①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。
两板件互相垂直或成一定角度连接时,在连接处以角钢作为连接件,把构件铆接在一起称为()。
GSH表示(),它由()、()和()通过()键连接而成,活性基团是()。
压机的顶出机构与压缩模脱模机构通过()固定连接在一起
剪力墙结构的装配特点是通过后浇混凝土连接梁、板、柱以形成整体,柱下口通过套筒灌浆连接。
将两轴连接,在机器运转过程中两轴能分开的连接装置是()。
打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体,以便在 E.coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点,因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行:载体用 BamHI切割以后,立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸;接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合,加入 DNA连接酶后进行温育,连接之后,将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后,将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因,所以,转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照: 对照1: 将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上; 对照2: 将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上; 对照3: 将经切割(但未用碱性磷酸酶处理)并用连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上; 对照4: 将经切割(并用碱性磷酸酶处理过)并用 DNA连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细 菌细胞涂布在培养平板上。 在进行第一次实验时,感受态细胞不是自己制备的,结果,在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落(表 2)。在第二次实验中,自己制备感受态细胞,但这一次,所有的平板上都没有菌落生长(表 2)。接着又进行了第三次实验,这次得到了转化子(表 2)。从实验平板上挑出 12 个菌落,分离了质粒 DNA,并用 BamHI进行切割,其中 9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带,另三个克隆中切出一个cDNA 片段,实验终于获得成功。
你如何看待第一次的实验结果?对照 1 的目的是什么?
原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶:E.coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶,它是从 T4 噬菌体感染的 E.coli 中分离的种单链多肽酶,分子量为——』Oa,由 T4 噬菌体基因——编码。E.coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码,也是一条多肽链的单体,分子量为()kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异:第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同,TDNA连接酶用(),而 E.coli DNA连接酶则用()作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同,在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E.coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件,E.coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的()。
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通过相同属性的元组把两个关系连接在一起构成新的关系的操作称为连接。
将两只或两只以上电阻的两端分别接在一起后接入电路,各电阻承受同一电压。这种电阻的连接方式称为电阻()。
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下列直接参与底物水平磷酸化的酶是()
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