分别用限量补充培养法和影印接种法,从野生型和营养缺陷型混合菌液中检出营养缺陷型菌株
(1)限量补充法:把诱变处理后的细胞接种在含有微量蛋白胨的基本培养基上,野生型细胞就迅速长成较大的菌落,而营养缺陷型则生长缓慢,并只能形成微小的菌落。(2)影印接种法:将诱变处理后的细胞涂在一个完培养基的表面上,经培养后使其长出许多菌落,然后用包有反菌丝绒布的木质圆柱,把此皿上的全部菌落转印到另一基本培养基平板上。经培养后,比较这两个平板上长出的菌落。如果发现在前一培养皿平板上的某一部位长有菌落,而在后一平板的相应部位却不长,说明这就是一个营养缺陷型菌株。它们的共同原理是:在基本培养基中,野生型的菌株能正常生长,而营养缺陷型的菌株不能生长。因此,将诱变后的菌株先在基本培养基上培养一段时间后,再用完全培养基培养,就可除去野生型菌株,而得到营养缺陷型。
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