湿热灭菌控制的温度和时间是综合培养基中耐热芽孢杆菌的完全死灭和培养基中营养成分破坏降到最低程度来加以确定的。当灭菌温度确定以后，灭菌时间系指物料颗粒的热穿时间，耐热菌的热死亡时间和安全事件之和。根据生产实践经验，实罐灭菌以119～120℃，20～30分钟，连续灭菌以126～132℃，5～7分钟控制为宜。如果片面地认为温度越高、时间越长、灭菌越彻底，必将使培养基中有效的营养成分破坏殆尽。甚至可能产生有害物质，使抗生素发酵产生水平下降。所以湿热灭菌时必须严格控制好灭菌的湿度和时间。