试述基因转移技术定义及其方法。
基因转移(genetransfer)指向受体细胞中导入外源基因,是改造细胞遗传性状的常用手段。基因转移又常称为基因转染(genetransfection),可分为物理学、化学和生物学三类方法。(1)物理学方法:基因转移的物理学方法包括裸露DNA直接注射、电穿孔、基因枪、显微注射等。(2)化学方法:基因转移的化学方法包括磷酸钙沉淀、DEAE-葡聚糖、脂质体法等,是通过增加细胞膜的通透性、增加胞吞或胞饮、增加DNA与细胞的吸附等机理而实现基因转移的。(3)生物学方法:基因转移的生物学方法主要指病毒介导的基因转移。根据受体细胞类型的不同,可选择使用具有不同宿主范围和不同感染途径的病毒基因组作为转染载体。目前常用的病毒载体包括DNA病毒载体(包括腺病毒载体、腺相关病毒载体)和RNA病毒载体(如逆转录病毒载体)等。
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