简述细胞融合的三种方法及其原理?
①生物法——仙台病毒法,原理:病毒被膜具有凝聚细胞的能力,它一边黏连一个细胞的表面,另一边黏连另一个细胞的表面,从而使两个细胞在病毒的作用下靠近发生凝结,诱导细胞的融合。
②化学法,PEG+Ca的作用机理:PEG分子具有轻微的负极性,与具有正极性基团的物质形成氢键,在原生质体之间形成分子桥,使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合;Ca和磷酸根离子结合形成不溶于水的络合物,作为“钙桥”,从而促进了融合。
③电处理融合法,原理:采用直流电脉冲的诱导,可改变原生质体质膜表面的电荷,使异种原生质体粘合,并使原生质膜瞬间破裂,相邻的原生质体连接、闭合、产生融合体。
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